怎樣避免液相色譜流動相使用時的10個壞習慣
在流動相使用過程中應該做的事情,除了有所為,還要有所不為,那有哪些習慣是需要避免的呢?
1、加入有機相之后再測量流動相的PH值
通常情況下測量流動相的PH值,是測量水相中的PH值參數。有機相加入之后PH值參數的測量就和之前有誤差。PS:但如果能保證每次測量都是加入相同量的有機相之后得到的PH值,雖然這不能保證精確度,但是這能保證前后一致的測量結果,所以這樣也沒有問題。
2、不使用緩沖鹽
緩沖鹽的加入是用來控制和修正流動相中PH值的改變的。樣品基質、空氣中的CO2、水中的雜質都會造成流動相PH值的改變,而PH值的改變會影響樣品的保留、峰形、峰面積參數。
3、沒有在正確的緩沖區間使用緩沖鹽
每個緩沖鹽都有一定的緩沖范圍,在此范圍內它提供了最佳的pH穩定性。在這個范圍外,緩沖鹽在抵抗pH值變化方面是無效的。所以要么在正確的范圍內使用緩沖鹽,要么選擇一個緩沖范圍覆蓋所需pH值的緩沖鹽。
4、向有機相中加入緩沖鹽
如果將水相的緩沖溶液加入到有機相中,會大大增加緩沖鹽析出的風險。緩沖鹽的析出在初期可能并不明顯,但會對儀器的各個部件都會產生一定影響。(延伸閱讀:做完樣品記得移除系統中的緩沖鹽哦!)
5、梯度洗脫時直接用泵去混合流動相并且流動相比例從0%開始
現在的液相色譜能夠非常高效的進行在線脫氣和流動相混合。但是將梯度洗脫比例從0%開始,會有比較大的出現氣泡和沉淀的風險。(延伸閱讀:深度剖析等度洗脫和梯度洗脫的適用范圍和方法設置)
6、沒有使用正確的pH值修飾酸或堿作為緩沖液
緩沖溶液的修飾酸或堿,只使用生成緩沖鹽的酸或堿。例如,磷酸鈉緩沖液只能用磷酸或氫氧化鈉調節。
7、沒有在方法中說明緩沖液的全部信息
例如只在方法中寫“稱5克磷酸鈉溶入1000毫升水”。緩沖鹽的類型決定其pH緩沖范圍,而緩沖鹽中所需物質的濃度決定了緩沖強度。例如:5g的無水磷酸鈉和5g的一水磷酸鈉具有不同的緩沖強度,會影響保留率。
8、使用儀器時不調查之前使用的流動相情況,直接用純有機溶劑沖系統
如果之前的方法在B通道使用緩沖溶液,而這次沒有經過調查就直接在B通道使用了純的有機溶劑,那么就會造成該通道緩沖鹽析出、出現堵塞等風險。
9、將溶劑瓶中的流動相用干為止
溶劑瓶中的流動相如果用干,會導致儀器中出現氣泡等問題。
10、僅使用超聲來給流動相脫氣
超聲脫氣有一定的脫氣作用,但完全脫氣的效果并不理想。所以在此建議使用真空脫氣機進行在線脫氣。
以上就是在使用流動相時,大家應該避免的10個壞習慣。歡迎大家分享自己的經驗!