高效液相色譜儀測(cè)定蛹蟲草培養(yǎng)基中核苷類成分
2020-02-06 10:39:53來源：admin
蛹蟲草(Cordyceps militaris (L.ex Fr.)Link)又稱北蟲草、北冬蟲夏草，與冬蟲夏草同屬異種，有效成分相近，同時(shí)又可以大規(guī)模的人工栽培，現(xiàn)代科學(xué)研究發(fā)現(xiàn)其具有抗癌、增強(qiáng)免疫、降血壓等多種藥理活性。現(xiàn)已被廣泛應(yīng)用于藥品和保健品中。蛹蟲草所含的一類重要活性成分是核苷和堿基，包括蟲草素、腺苷等。其中腺苷具有改善心腦血液循環(huán)、抑制中樞神經(jīng)遞質(zhì)釋放等多種活性，現(xiàn)已被我國(guó)用作冬蟲夏草及其制品和代用品的質(zhì)控指標(biāo)之一；蟲草素則具有抗病毒、抑制腫瘤等功效，目前在美國(guó)作為治療白血病藥物的研究已經(jīng)進(jìn)入二期臨床，開發(fā)潛力巨大。
目前，核苷類物質(zhì)的檢測(cè)方法以高效液相色譜儀分析為主，包括正相、反相、質(zhì)譜聯(lián)用等，還有毛細(xì)管電泳分析測(cè)定，但大都只將核苷類成分中的1～3 個(gè)作為質(zhì)控指標(biāo)進(jìn)行評(píng)估。本研究在高效液相色譜中采用了正相柱分析，用8 個(gè)核苷類成分作為對(duì)照，考察測(cè)定方法的精密度、重復(fù)性和穩(wěn)定性，以此作為各樣品核苷類成分的分析方法。
人工栽培蛹蟲草培養(yǎng)基中含有大量的蟲草素，與相應(yīng)的子實(shí)體相比，培養(yǎng)基來源充足，價(jià)格低廉，作為制備蟲草素的原料，可以大大降低成本。但是由于目前栽培的蛹蟲草菌種來源不同，其培養(yǎng)基中蟲草素含量是否具有很大的差異，與對(duì)應(yīng)的子實(shí)體中蟲草素含量的差異是否存在相關(guān)性等需要進(jìn)一步研究。故本實(shí)驗(yàn)對(duì)市場(chǎng)上冬蟲夏草及不同來源的蛹蟲草子實(shí)體中核苷類物質(zhì)的含量進(jìn)行分析測(cè)定，并對(duì)同一菌種的子實(shí)體和培養(yǎng)基進(jìn)行核苷類成分的比較，分析蛹蟲草固體發(fā)酵產(chǎn)物中核苷類成分的含量，為蟲草相關(guān)制品的開發(fā)提供依據(jù)。
山東譜析采用高效液相色譜儀法測(cè)定蟲草中的核苷類成分，優(yōu)化后的色譜條件為YMC-Polyamine 柱（250mm× 4.6mm，5μm）；采用梯度洗脫，流動(dòng)相：乙腈- 水（V/V）：0～15min 為90：10，15～20min 為86.5：13.5，20～30min 為75：25，30～35min 為70：30；流速：1mL/min；柱溫：30℃；檢測(cè)波長(zhǎng)：259nm；進(jìn)樣量：10μL。結(jié)果表明：胸腺嘧啶、蟲草素、尿嘧啶、腺苷、腺嘌呤、尿苷、鳥嘌呤、次黃嘌呤均能得到較好分離，該方法穩(wěn)定性好、精密度高、重現(xiàn)性好，適用于蟲草中的核苷類成分的分析。經(jīng)分析發(fā)現(xiàn)，蛹蟲草子實(shí)體核苷類物質(zhì)組成大致相似，但含量差異非常顯著，同時(shí)發(fā)現(xiàn)蛹蟲草培養(yǎng)基殘基及固體發(fā)酵產(chǎn)物中蟲草素含量較高，其他核苷類成分很少，因此認(rèn)定蛹蟲草培養(yǎng)基殘基及固體發(fā)酵產(chǎn)物是非常優(yōu)良的分離純化蟲草素的原料。
以上測(cè)定蟲草中的核苷類成分高效液相色譜儀方案由山東譜析儀器色譜小編整理制定，不盡事宜歡迎各界朋友共同探討研究。更多分析上的詳細(xì)資料可電話或通過公司網(wǎng)站了解垂詢，歡迎合作。
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