液相色譜儀作為實驗室使用普及的分析儀器一直受到色譜工作者的青睞。由于液相自動進樣器價格昂貴，在一般常規實驗室應用較少，大部分采用手動進樣，這就給我們實際操作者帶來挑戰。山東譜析科學儀器有限公司結合本公司的LC-3000有效液相色譜儀，總結出對手動進樣步驟和使用保養要點，以饗各位同行。

液相色譜儀手動進樣操作步驟：

1、吸樣后擦針、排氣泡；

2、進樣狀態(inject)下插針到底部；

3、快速切到裝填(load)狀態；

4、較快勻速推針桿，注入樣品；

5、快速切回inject；

6、快速拔針。步驟要牢記，速度要把握好，熟練才是**的。

液相色譜儀手動六通進樣閥操作經驗及保養事宜：

1、對手動閥要盡快轉動，不能停留在中途。

2、注射器針頭有別于氣相色譜，是平頭注射器。平針頭的優點：A：針頭外側緊貼密封墊內側，密封性能好，不漏液，不引入空氣。B：防止針頭刺壞密封墊及劃傷定子。應該注意選擇質量好的液相色譜專用注射器。

3、裝液量有部分裝液法和完全裝液法兩種。A：部分裝液法進樣時，進樣量*多為定量環體積的75%。B：完全裝液法進樣時，進樣量*少為定量環體積的3至5倍。這樣才能完全置換定量環內殘留的溶液。

4、可根據進樣體積的需要選擇定量環，一般不要求**計算定量環的體積。譬如，一根名義上10uL的定量環，實際是9uL還是11uL并不重要，因為被測樣品和校正樣品的進樣體積保持一致，在計算結果時誤差都被抵消了。

5、樣品溶液均要用濾膜過濾。防止微粒阻塞進樣閥和減少對進樣閥的磨損。

6、每天使用后應沖洗進樣器，通常用適當的有機溶劑、水或不含鹽的流動相沖洗，在進樣閥的Load和Inject位置 反復沖洗。

7、注意擦拭注射器針頭的外側。防止交叉污染。

液相色譜儀手動六通進樣閥的清洗：

對手動進樣閥的清洗，一般來說目的就是為了消除交叉污染或樣品的殘留產生鬼峰從而造成進樣重復性變差等問題。一般來說我們采用的進樣方式都為在inj狀態下進針，然后轉換到load狀態進樣，然后轉換到inj狀態，然后拔針。這種進樣方式樣品的主要殘留在自進樣口到轉子密封這一段。沖洗方式為：采用閥自帶的針孔清潔器用不含鹽的流動相，在load 和inj 兩種狀態反復沖洗沖洗目的不是為了沖洗定量環，而是為了沖洗自進樣口至轉子密封這一段，和廢液管。

固定的沖洗可以沖掉進樣口粘附的樣品及可能的鹽，樣品殘留可能影響測定結果，鹽殘留可能磨損定子和轉子之間的光滑面。具體先后吸超純水和色譜純甲醇沖洗。一般在關閉液相色譜儀后再清洗，因為有些六通閥帶有觸發開關，你在扳動六通閥的時候，梯度程序會自動啟動。還有在進一針高濃度的樣品后一般要沖洗。